醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))沉降菌的測試方法
國標（GB）簡介：
“GB”代表中國國家標準，其中“G”和“B”分別取自“國標”二字的漢語拼音首字母。國家標準分為兩類：強制標準（GB）和推薦標準（GB/T）。推薦標準帶有“/T”，其中“T”代表“推薦”的漢語拼音首字母。
了解GB/T16294-2010：
GB/T16294-2010是針對醫(yī)藥工業(yè)潔凈室及潔凈區(qū)的沉降菌測試和環(huán)境驗證的標準。盡管它是特定于潔凈區(qū)的，但也可用于評估任何環(huán)境中的污染程度。
一、GB/T16294-2010解讀
1. 適用范圍
本標準適用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)的沉降菌測試。實際上，它可以用于任何需要評估潔凈度的環(huán)境。
2. 基本概念
- 沉降菌：指通過自然沉降到培養(yǎng)皿中的活微生物粒子。
- 沉降菌菌落數：通過計算每個培養(yǎng)皿中的菌落數來評估潔凈度。
3. 測試方法
- 通過讓空氣中的微生物自然沉降到培養(yǎng)皿中，然后在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，直到可以肉眼觀察到菌落。
- 需要專業(yè)人員執(zhí)行，但具備相關知識和技能的人也可以進行。
4. 測試準備
- 所用物品必須提前嚴格消毒。
- 需要設立空白對照組以確保準確性。
5. 培養(yǎng)基選擇
- 可以選擇大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）或沙氏培養(yǎng)基（SDA），或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
- 可以使用90mm×15mm高硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿或一次性培養(yǎng)皿。
6. 測試點布置
- 平板放置位置應參照GB16292-2010，并考慮關鍵設備和活動范圍。
- 平板應放置在氣流相對穩(wěn)定的區(qū)域，采樣點高度一般在0.8m至1.5m之間。
7. 菌落計數
- 按照每個培養(yǎng)皿中的菌落數進行計數。
- 若空白對照污染，試驗結果無效，需重新測試。
二、潔凈室沉降菌的詳細測試方法
1. 制備固體培養(yǎng)基
- 參照“微生物菜譜-培養(yǎng)基”相關內容進行制備。
2. 布置固體平板位置
- 參照GB16292-2010進行平板位置布置，并確保培養(yǎng)皿數量符合要求。
3. 沉降采樣
- 在布置好的位置放置至少兩個平板（一個實驗組，一個空白對照），并標記。
- 打開實驗組平板蓋進行采樣，對照組保持封閉。
- 微生物沉降一定時間后，合上實驗組平板蓋。
4. 培養(yǎng)
- 將實驗組和對照組平板放置于恒溫恒濕培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)。
5. 計數統(tǒng)計
- 培養(yǎng)結束后，直接觀察并計數菌落。
6. 評估潔凈室潔凈度
- 潔凈室的等級數字越小，表示潔凈度越高，污染程度越低。
三、操作技巧和注意事項
1. 所有儀器和試劑必須嚴格滅菌，以保證測試的可靠性。
2. 可以提前兩天制作固體平板，并進行空培養(yǎng)兩天，以防止平板污染。
3. 測試前檢查每個培養(yǎng)皿的質量，剔除變質、破損或污染的皿。
4. 采樣時盡量減少人員流動。
5. 每個采樣點至少放置三個平皿，并設立空白對照組。
6. 計數時要仔細辨別所有菌落，包括重疊的菌落。
7. 試驗過程中，記錄溫度、濕度、人員流動、培養(yǎng)及成分等信息。
8. 若空白對照污染，試驗結果無效，需重新測試。
文稿來源：全國標準信息服務平臺